Modern PRP: „Klinický PRP“
Prostredníctvom experimentálneho a klinického výskumu teraz lepšie rozumieme fyziológii krvných doštičiek a iných buniek.Okrem toho niekoľko vysokokvalitných systematických hodnotení, metaanalýz a randomizovaných kontrolovaných štúdií preukázalo účinnosť biotechnológie PRP v mnohých lekárskych oblastiach vrátane dermatológie, srdcovej chirurgie, plastickej chirurgie, ortopedickej chirurgie, liečby bolesti, liečby miechy a športovej medicíny .
Súčasná charakteristika PRP je jeho absolútna koncentrácia krvných doštičiek, ktorá sa mení z počiatočnej definície PRP (vrátane koncentrácie krvných doštičiek vyššia ako základná hodnota) na viac ako 1 x 106/µl alebo asi 5 -násobok minimálnej koncentrácie krvných doštičiek v krvných doštičkách v krvných doštičkách v krvných doštičkách základná hodnota.V rozsiahlom prehľade Fadadu et al.Vyhodnotilo sa 33 systémov a protokolov PRP.Počet krvných doštičiek konečného prípravky PRP produkovaného niektorými z týchto systémov je nižší ako v celej krvi.Uviedli, že faktor krvných doštičiek PRP sa zvýšil na nízku ako 0,52 s jednou spinovou súpravou (Selphyl®).Naopak, dvojitá rotácia Emcyte Genesis PurePRPII®, koncentrácia krvných doštičiek produkovaná zariadením je najvyššia (1,6 x 106 /ul).
Podobne aj štúdia porovnávania zariadení nepodporuje rozhodnutie, pretože ukazujú, že koncentrácia krvných doštičiek medzi zariadeniami PRP je veľmi odlišná.Našťastie prostredníctvom technológie a analýzy založenej na proteomike môžeme zvýšiť naše chápanie funkcií buniek v PRP, ktoré ovplyvňujú výsledky liečby.Pred dosiahnutím konsenzu na štandardizovaných prípravkoch a formuláciách PRP by sa mala PRP riadiť klinickými formuláciami PRP, aby sa podporilo podstatné mechanizmy opravy tkanív a progresívne klinické výsledky.
Klinický PRP
V súčasnosti bola účinná klinická PRP (C-PRP) charakterizovaná ako komplexné zloženie autológnych mnohobunkových zložiek v plazme malého objemu získanej z časti periférnej krvi po odstredení.Po centrifugácii sa môžu PRP a jeho komponenty bez planíc z koncentračného zariadenia obnoviť podľa rôznych hustoty buniek (z ktorých je hustota krvných doštičiek najnižšia).
Použite zariadenia na separáciu hustoty buniek PurePRP-SP (Emcyte Corporation, Fort Myers, FL, USA) sa použili pre celú krv po dvoch postupoch centrifugácie.Po prvom procese centrifugácie bola celá zložka krvi rozdelená na dve základné vrstvy, doštičku (štíhle) plazmatickú suspenziu a vrstvu červených krviniek.Zväčšenie v B ukazuje, že na spodnej časti zariadenia je organizovaná viaczložková erytrocytová sedimentačná vrstva (predstavovaná modrou čiarou), ktorá obsahuje vysoké koncentrácie krvných doštičiek, monocytov a lymfocytov na základe gradientu hustoty.V tomto príklade podľa protokolu prípravy C-PRP so zlými neutrofilmi sa extrahuje minimálne percento neutrofilov (<0,3%) a erytrocytov (<0,1%).
Granulovanie doštičiek
V skorej klinickej aplikácii PRP sú a- granule najčastejšie citovanou vnútornou štruktúrou krvných doštičiek, pretože obsahujú koagulačné faktory, veľké množstvo PDGF a angiogénne regulátory, ale majú malú tromgénnu funkciu.Medzi ďalšie faktory patrí menej známe zložky chemokínu a cytokínu, ako je faktor 4 doštičiek 4 (PF4), základný proteín pred platletou, p-selektín (aktivátor integrínu) a chemokínový výkrik (regulovaný aktiváciou, exprimujúci normálny T bunky a pravdepodobne vylučovanie).Celkovou funkciou týchto špecifických komponentov granúl krvných doštičiek je nábor a aktivácia ďalších imunitných buniek alebo indukuje zápal endotelových buniek.
Ako regulátory aktivácie doštičiek a trombózy sa implicitne používajú husté granulované zložky, ako je ADP, serotonín, polyfosfát, histamín a adrenalín.Najdôležitejšie je, že mnohé z týchto prvkov majú funkciu modifikácie imunitných buniek.ADP doštičiek je rozpoznávaný receptorom P2Y12ADP na dendritických bunkách (DC), čím sa zvyšuje endocytóza antigénu.DC (bunka prezentujúca antigén) je veľmi dôležitá na začatie imunitnej reakcie T buniek a kontrola ochrannej imunitnej reakcie, ktorá spája vrodený imunitný systém a adaptívny imunitný systém.Okrem toho adenozín trifosfát doštičiek (ATP) vysiela signály cez receptor P2X7 T buniek, čo vedie k zvýšenej diferenciácii pomocných buniek CD4 T do prozápalových T pomocníkovi 17 (Th17).Ostatné komponenty hustých doštičiek (ako je glutamát a serotonín) indukujú migráciu T buniek a zvyšujú diferenciáciu monocytov na DC.V PRP sú tieto imunomodulátory odvodené z hustých častíc vysoko obohatení a majú značné imunitné funkcie.
Koncentrácia
C-PRP by mal obsahovať klinické dávky koncentrovaných doštičiek na vyvolanie priaznivých terapeutických účinkov.Krvné doštičky v C-PRP by mali stimulovať proliferáciu buniek, syntézu mezenchymálnych a neurotrofických faktorov, podporovať migráciu chemotaktických buniek a stimulovať imunoregulačnú aktivitu, ako je znázornené na obrázku.
Aktivované doštičky, uvoľňovanie PGF a adhéznych molekúl sprostredkujú rôzne bunkové interakcie: chemotaxia, bunkovú adhéziu, migráciu a diferenciáciu buniek a regulujú imunitné regulačné aktivity.Tieto interakcie bunkových krvných doštičiek prispievajú k angiogenéze a zápalovej aktivite a nakoniec stimulujú proces opravy tkanív.Skratky: BMA: Aspirát z kostnej drene, EPC: endotelové progenitorové bunky, EC: endotelové bunky, 5-HT: 5-hydroxytryptamín, Rantes: Aktivovaná regulácia normálnej expresie T buniek a predpokladanej sekrécie JAM: JAM: 40 Ligand, SDF-1 a ： Stromálne bunky odvodené od faktora-1 a ， CXCL: chemokín (CXC motív) ligand, PF4: Faktor krvných doštičiek 4. upravený od Everts et al.
Marx bol prvou osobou, ktorá dokázala, že sa zvýšilo hojenie kostí a mäkkého tkaniva, a minimálny počet krvných doštičiek bol 1 x 106 /µl。 Tieto výsledky sa potvrdili v štúdii bedrovej fúzie prostredníctvom medzistavcového foramenu, keď bola dávka krvných doštičiek väčšia ako väčšia ako dávka krvných doštičiek 1,3 × pri 106 krvných doštičkách/µl, táto štúdia preukázala viac fúzie.Okrem toho Giusti a kol.Odhalený 1,5 x mechanizmus opravy tkanív v dávke 109 vyžaduje doštičku/ml na vyvolanie funkčnej angiogenézy prostredníctvom aktivity endoteliálnych buniek.V druhej štúdii vyššia koncentrácia znížila angiogenézu potenciálu krvných doštičiek vo folikuloch a okolo neho.Okrem toho predchádzajúce údaje ukázali, že dávka PRP by tiež ovplyvnila výsledky liečby.Preto, aby sa významne vyvolala reakcia angiogenézy a stimulovala proliferáciu buniek a migráciu buniek, C-PRP by mala obsahovať najmenej 7,5 v 5-ml PRP ošetrenej fľaši × 10 9 môže dodávať doštičky.
Okrem závislosti od dávky sa zdá, že účinok PRP na aktivitu buniek je vysoko závislý.Sophie a kol.Tieto výsledky naznačujú, že krátkodobá expozícia ľudským lyzátom doštičiek môže stimulovať proliferáciu kostných buniek a chemotaxiu.Naopak, dlhodobá expozícia PRP povedie k nižším hladinám alkalickej fosfatázy a tvorby minerálov.
červená krvinka
Červené krvinky sú zodpovedné za transport kyslíka do tkanív a prenosu oxidu uhličitého z tkanív do pľúc.Nemajú jadro a sú zložené z hemových molekúl, ktoré sa viažu na proteíny.Zložky železa a hemu v červených krvinkách podporujú kombináciu kyslíka a oxidu uhličitého.Všeobecne platí, že životný cyklus červených krviniek je asi 120 dní.Z obehu sú odstránené makrofágmi procesom nazývaným starnutie RBC.Červené krvinky vo vzorkách PRP môžu byť poškodené pri šmykových podmienkach (napríklad chirurgia krvácania z krvi, imunitne sprostredkovaný proces, oxidačný stres alebo nedostatočná schéma koncentrácie PRP).Preto sa membrána RBC rozkladá a uvoľňuje toxický hemoglobín (HB), meraný hemoglobínom bez plazmy (PFH), hemu a železa.].PFH a jeho degradačné produkty (heme a železo) spoločne vedú k škodlivým a cytotoxickým účinkom na tkanivá, čo vedie k oxidačnému stresu, strate oxidu dusnatého, aktivácia zápalových dráh a imunosupresia.Tieto účinky nakoniec povedú k dysfunkcii mikrocirkulácie, lokálnej vazokonstrikcii a vaskulárnemu poškodeniu, ako aj vážnemu poškodeniu tkaniva.
Najdôležitejšie je, že keď sa do tkaniva dodáva RBC obsahujúci C-PRP, spôsobí lokálnu reakciu nazývanú eryptóza, ktorá spustí uvoľňovanie účinného inhibítora migrácie cytokínov a makrofágov.Tento cytokín inhibuje migráciu monocytov a makrofágov.Vyvíja silné prozápalové signály k okolitým tkanivám, inhibuje migráciu kmeňových buniek a proliferáciu fibroblastov a vedie k významnej dysfunkcii lokálnych buniek.Preto je dôležité obmedziť kontamináciu RBC pri prípravách PRP.Okrem toho nebola nikdy stanovená úloha červených krviniek v regenerácii tkanív.Primeraný proces odstreďovania a prípravy C-PRP sa zvyčajne zníži alebo dokonca odstráni prítomnosť červených krviniek, čím sa zabráni nepriaznivým dôsledkom hemolýzy a polycytémie.
Leukocyty v C-PRP
Prítomnosť bielych krviniek v prípravkoch PRP závisí od liečby a schémy prípravy.V zariadení PRP na báze plazmy sú biele krvinky úplne eliminované;Biele krvinky sa však významne koncentrovali pri príprave hnedej vrstvy sedimentácie sedimentácie erytrocytov.Vďaka svojim imunitným a hostiteľským obranným mechanizmom, biele krvinky výrazne ovplyvňujú vnútornú biológiu akútnych a chronických tkanivových podmienok.Tieto funkcie budú diskutované ďalej nižšie.Preto prítomnosť špecifických leukocytov v C-PRP môže spôsobiť významné bunkové a tkanivové účinky.Konkrétnejšie, rôzne systémy Sedimentácie erytrocytov PRP erytrocyty používajú rôzne schémy prípravy, čím sa v PRP produkujú rôzny podiel neutrofilov, lymfocytov a monocytov.Eozinofily a bazofily sa nedajú merať v prípravkoch PRP, pretože ich bunkové membrány sú príliš krehké na to, aby odolali odstredivovým spracovateľským silám.
Neutrofily
Neutrofily sú nevyhnutné leukocyty v mnohých liečivých dráhach.Tieto dráhy sa kombinujú s antimikrobiálnymi proteínmi prítomnými v krvných doštičkách, aby vytvorili hustú bariéru proti invazívnym patogénom.Existencia neutrofilov je určená podľa cieľa liečby C-PRP.V bioterapii chronickej starostlivosti o rany alebo v aplikáciách zameraných na rast kostného rastu alebo hojenia môžu byť potrebné zvýšené hladiny zápalu tkaniva.Dôležité je, že v niekoľkých modeloch sa našli ďalšie neutrofilové funkcie, ktoré zdôrazňujú ich úlohu v angiogenéze a opravách tkanív.Neutrofily však môžu tiež spôsobiť škodlivé účinky, takže pre niektoré aplikácie nie sú vhodné.Zhou a Wang dokázali, že použitie PRP bohatých na neutrofily môže viesť k zvýšeniu pomeru kolagénu typu III k kolagénu typu I, čím sa zhoršuje fibróza a redukuje silu šľachy.Ďalšími škodlivými charakteristikami sprostredkovanými neutrofilmi je uvoľňovanie zápalových cytokínov a matricových metaloproteináz (MMP), ktoré môžu podporovať zápal a katabolizmus, keď sa aplikujú na tkanivá.
Leukomonocyt
V C-PRP sú mononukleárne T a B lymfocyty koncentrovanejšie ako akékoľvek iné biele krvinky.Úzko súvisia s bunkovými sprostredkovanými cytotoxickou adaptívnou imunitou.Lymfocyty môžu vyvolať bunkové reakcie na boj proti infekcii a prispôsobenie sa útočníkom.Okrem toho cytokíny odvodené od T-lymfocytov (interferón-y [IFN-y] a interleukín-4 (IL-4) zvyšujú polarizáciu makrofágov. Verassar a kol. Je dokázané, že konvenčné T lymfocyty môžu nepriamo propagovať tkanivo v hojení pri hojení tkanív pri hojení tkanív pri hojení tkanív pri hojení tkanív pri hojení tkanív pri hojení tkanív pri hojení tkanív pri hojení tkaniva v pridelení tkaniva je v Myší model reguláciou diferenciácie monocytov a makrofágov.
Monocyty - viacotentná opravárenská bunka
Podľa použitého prípravného zariadenia PRP môžu monocyty vyčnievať alebo neexistujú vo fľaši na ošetrenie PRP.Bohužiaľ, ich výkonnosť a regeneračná schopnosť sa v literatúre zriedka diskutuje.Preto sa monocytom venuje malá pozornosť v metóde prípravy alebo konečným vzorcom.Skupina monocytov je heterogénna, pochádza z progenitorových buniek v kostnej dreni a transportovaná do periférnych tkanív cez hematopoetickú kmeňovú bunkovú dráhu podľa stimulácie mikroprostredia.Počas homeostázy a zápalu cirkulujúce monocyty opúšťajú krvný obeh a prijímajú sa na zranené alebo degradované tkanivá.Môžu pôsobiť ako makrofágy (M φ) efektorové bunky alebo progenitorové bunky.Monocyty, makrofágy a dendritické bunky predstavujú mononukleárny fagocytárny systém (MPS). Typickým znakom MPS je plasticita jeho vzoru génovej expresie a funkčné prekrývanie medzi týmito typmi buniek.V degenerovaných tkanivách, rezidentných makrofágoch, lokálne pôsobiacich rastových faktoroch, prozápalových cytokínoch, apoptotických alebo nekrotických bunkách a mikrobiálnych produktov iniciujú monocyty na diferenciáciu do skupín buniek MPS.Predpokladajme, že keď sa do lokálneho mikroprostredia choroby vstrekujú monocyty obsahujúce vysoké výnosné výnosy, monocyty sa pravdepodobne diferencujú na M φ, aby spôsobili hlavné zmeny buniek.
Od monocytov po M φ v procese transformácie, špecifický fenotyp M φ.V posledných desiatich rokoch bol vyvinutý model, ktorý integruje M φ komplexný mechanizmus aktivácie je opísaný ako polarizácia dvoch opačných stavov: M φ fenotyp 1 (M φ 1, klasická aktivácia) a fenotyp 2 (M φ (M φ 1 2, alternatívna aktivácia).M φ 1 sa vyznačuje zápalovým sekréciou cytokínov (IFN-y) a oxidom dusnatého, aby sa vytvoril účinný mechanizmus usmrcovania patogénov.M φ fenotyp tiež produkuje vaskulárny endoteliálny rastový faktor (VEGF) a fibroblastový rastový faktor (FGF).M φ fenotyp sa skladá z protizápalových buniek s vysokou fagocytózou.M φ 2 produkuje komponenty extracelulárnej matrice, angiogenézu a chemokíny a interleukín 10 (IL-10).Okrem obrany patogénov, M φ môže tiež znížiť zápal a podporovať opravu tkaniva.Je pozoruhodné, že M φ 2 bol rozdelený na M in vitro φ 2A 、 M φ 2B a M φ 2. Závisí to od stimulu.In vivo translácia týchto podtypov je náročná, pretože tkanivo môže obsahovať zmiešané skupiny M φ.Je zaujímavé, že na základe miestnych environmentálnych signálov a úrovní IL-4 je možné prevedenie M φ 1 previesť na podporu opravy M φ 2。 Z týchto údajov, je rozumné predpokladať, že existujú vysoké koncentrácie monocytov a prípravky M φ C-PRP Môže prispievať k lepšej oprave tkaniva, pretože majú protizápalové opravy tkaniva a schopnosti transdukcie bunkového signálu.
Zmätená definícia frakcie bielych krviniek v PRP
Prítomnosť bielych krviniek vo fľašiach liečby PRP závisí od prípravného zariadenia PRP a môže mať významné rozdiely.Existuje veľa sporov o existencii leukocytov a ich prínose k rôznym produktom sub-PRP (ako sú PRGF, P-PRP, LP-PRP, LR-PRP, P-PRF a L-PRF) v nedávnom prehľade šesť randomizovaných Kontrolované štúdie (úroveň dôkazov 1) a tri prospektívne porovnávacie štúdie (úroveň 2) sa týkalo 1055 pacientov, čo naznačuje, že LR-PRP a LP-PRP mali podobnú bezpečnosť.Autor dospel k záveru, že nežiaduca reakcia PRP nemusí priamo súvisieť s koncentráciou bielych krviniek.V inej štúdii LR-PRP nezmenil zápalový interleukín (IL-1) v OA koleno β 、 IL-6, IL-8 a IL-17).Tieto výsledky podporujú názor, že úloha leukocytov v biologickej aktivite PRP in vivo môže pochádzať z presluch medzi doštičkami a leukocytmi.Táto interakcia môže podporovať biosyntézu iných faktorov (ako je lipoxygén), ktoré môžu kompenzovať alebo podporovať regresiu zápalu.Po počiatočnom uvoľnení zápalových molekúl (kyselina arachidónová, leukotrién a prostaglandín) sa lipoxygén A4 uvoľňuje z aktivovaných doštičiek, aby sa zabránilo aktivácii neutrofilov.V tomto prostredí je fenotyp M φ z M φ 1 na M φ 2。 navyše rastie dôkaz, že cirkulujúce mononukleárne bunky sa môžu v dôsledku ich pluripotencie diferencovať na rôzne nemagocytové typy buniek.
Typ PRP ovplyvní kultúru MSC.V porovnaní s čistými vzorkami PRP alebo PPP môže LR-PRP indukovať významne vyššiu proliferáciu MSC odvodených z kostnej drene (BMMSC), s rýchlejším uvoľňovaním a lepšou biologickou aktivitou PGF.Všetky tieto charakteristiky vedú k pridávaniu monocytov do fľaše na liečbu PRP a rozpoznávaniu ich imunomodulačných schopností a diferenciácie.
Vrodená a adaptívna imunitná regulácia PRP
Najslávnejšou fyziologickou funkciou krvných doštičiek je kontrola krvácania.Zhromažďujú sa v mieste poškodenia tkaniva a poškodených krvných ciev.Tieto udalosti sú spôsobené vyjadrením integrínov a selektínov, ktoré stimulujú adhéziu a agregáciu krvných doštičiek.Poškodený endotel tento proces ďalej zhoršuje a exponovaný kolagén a ďalšie proteíny subendoteliálnej matrice podporujú hlbokú aktiváciu krvných doštičiek.V týchto prípadoch sa preukázala dôležitá úloha interakcie medzi faktorom Von Willebrand (VWF) a glykoproteínom (GP), najmä GP-IB.Po aktivácii krvných doštičiek husté doštičky, lyzozóm a T-granuly regulujú exocytózu a uvoľňujú svoj obsah do extracelulárneho prostredia.
Adhézna molekula
Aby sme lepšie pochopili úlohu PRP v zápalových tkanivách a krvných doštičkách v imunitnej reakcii, mali by sme pochopiť, ako rôzne receptory povrchových doštičiek (integríny) a molekuly adhézie spojenia (JAM) a bunkové interakcie môžu iniciovať kritické procesy v vrodenej a adaptívnej imunite.
Integríny sú molekuly adhézie bunkového povrchu nachádzajúce sa v rôznych typoch buniek a exprimované vo veľkých množstvách na doštičkách.Integríny zahŕňajú A5B1, A6B1, A2B1 LFA-2, (GPIA/IIA) a AIIBB3 (GPIIB/IIIA).Zvyčajne existujú v statickom a nízkom afinitnom stave.Po aktivácii prepínajú na stav afinity na väzbu s vysokou ligandom.Integríny majú rôzne funkcie na doštičkách a zúčastňujú sa na interakcii doštičiek s niekoľkými typmi bielych krviniek, endotelových buniek a extracelulárnej matrice.Okrem toho je komplex GP-IB-V-IX exprimovaný na membráne doštičiek a je hlavným receptorom na väzbu s von VWF.Táto interakcia sprostredkuje počiatočný kontakt medzi doštičkami a exponovanými subendoteliálnymi štruktúrami.Integrín a komplex GP doštičiek súvisia s rôznymi zápalovými procesmi a zohrávajú dôležitú úlohu pri tvorbe komplexu doštičiek a leukocytov.Konkrétne je potrebný integrín AIIBB3 na vytvorenie stabilného komplexu kombináciou fibrinogénu s receptorom antigénu 1 makrofágom 1 (MAC-1) na neutrofiloch.
Doštičky, neutrofily a vaskulárne endotelové bunky exprimujú špecifické bunkové adhézne molekuly, nazývané selektín.V zápalových podmienkach doštičky exprimujú p-selektín a neutrofilový L-selektín.Po aktivácii krvných doštičiek sa môže p-selektín viazať na ligand PSGL-1, ktorý existuje na neutrofiloch a monocytoch.Okrem toho väzba PSGL-1 iniciuje intracelulárnu kaskádovú reakciu signálu, ktorá aktivuje neutrofily prostredníctvom antigénu 1 neutrofilu MAC-1 a lymfocytov (LFA-1).Aktivované MAC-1 sa viaže na GPIB alebo GPIIB/IIIA na doštičkách cez fibrinogén, čím sa stabilizuje interakcia medzi neutrofilmi a krvnými doštičkami.Okrem toho sa aktivovaný LFA-1 môže kombinovať s medzibunkovou adhéznou molekulou doštičiek 2, aby sa ďalej stabilizovala komplex neutrofilových plachtov na podporu dlhodobej adhézie s bunkami.
Doštičky a leukocyty hrajú kľúčovú úlohu vo vrodených a adaptívnych imunitných reakciách
Telo dokáže rozpoznať cudzie telá a zranené tkanivá pri akútnych alebo chronických chorobách, aby sa iniciovali reakciu hojenia rany a zápalovú dráhu.Vrodené a adaptívne imunitné systémy chránia hostiteľa pred infekciou a biele krvinky zohrávajú dôležitú úlohu pri prekrývaní sa medzi týmito dvoma systémami.Konkrétne, monocyty, makrofágy, neutrofily a prírodné zabíjačky hrajú kľúčovú úlohu v vrodenom systéme, zatiaľ čo lymfocyty a ich podskupiny hrajú podobnú úlohu v adaptívnom imunitnom systéme.
Interakcie krvných doštičiek a leukocytov pri interakciách vrodených imunitných buniek.Doštičky interagujú s neutrofilmi a monocytmi a nakoniec s M φ interagujú, upravujú a zvyšujú svoje efektorové funkcie.Tieto interakcie krvných doštičiek a leukocytov vedú k zápalu rôznymi mechanizmami vrátane netózy.Skratky: MPO: myeloperoxidáza, ROS: reaktívne druhy kyslíka, TF: tkanivový faktor, sieť: Neutrofilový extracelulárny pasca, NF-K B: jadrový faktor kappa b, m φ ： makrofágy.
Vrodený imunitný systém
Úlohou vrodeného imunitného systému je nešpecifická identifikácia invazívnych mikroorganizmov alebo tkanivových fragmentov a stimulovať ich klírens.Keď niektoré molekulárne štruktúry nazývané receptory rozpoznávania povrchovej expresie (PRR) kombinujú s molekulárnymi vzormi súvisiacimi s patogénom a molekulárnymi vzormi súvisiacimi s poškodením, aktivuje sa vrodený imunitný systém.Existuje mnoho druhov PRR, vrátane receptora podobného mýtu (TLR) a RIG-1 ako receptor (RLR).Tieto receptory môžu aktivovať hlavný transkripčný faktor Kappa B (NF-K B) tiež reguluje viac aspektov vrodenej a adaptívnej imunitnej odpovede.Je zaujímavé, že doštičky tiež exprimujú rôzne molekuly imunoregulačných receptorov na ich povrchu a cytoplazme, ako je p-selektín, transmembránový proteín CD40 CD40 (CD40L), cytokíny (ako je IL-1 p β 、 TGF-β β a doštičkový TLR. . Preto doštičky môžu interagovať s rôznymi imunitnými bunkami.
Interakcia do krvných doštičiek v vrodenej imunite
Keď doštičky vstupujú alebo napadnú prietok krvi alebo tkanivo, doštičky sú jednou z buniek, ktoré najskôr detekujú endotelové poškodenie a mikrobiálne patogény.Agregácia krvných doštičiek a podporuje uvoľňovanie agonistov doštičiek ADP, trombínu a VWF, čo vedie k aktivácii krvných doštičiek a expresii chemokínových receptorov krvných doštičiek CC, CXC a CX3C, čím spôsobujú krvné doštičky v infikovanom mieste alebo poranení.
Vrodený imunitný systém je geneticky vopred určený na detekciu útočníkov, ako sú vírusy, baktérie, parazity a toxíny alebo tkanivové rany a rany.Je to nešpecifický systém, pretože akýkoľvek patogén bude identifikovaný ako cudzí alebo neosvetový a rýchlo umiestnený.Vrodený imunitný systém sa spolieha na súbor proteínov a fagocytov, ktoré rozpoznávajú dobre zachované charakteristiky patogénov a rýchlo aktivujú imunitnú reakciu, aby pomohli eliminovať útočníkov, aj keď hostiteľ nikdy predtým nebol vystavený špecifickým patogénom.
Neutrofily, monocyty a dendritické bunky sú najbežnejšími vrodenými imunitnými bunkami v krvi.Ich nábor je potrebný na primeranú včasnú imunitnú reakciu.Ak sa PRP používa v regeneračnej medicíne, interakcia do krvných buniek reguluje zápal, hojenie rán a opravu tkanív.TLR-4 na doštičkách stimuluje interakciu krvných doštičiek a neutrofilov, ktorá reguluje tzv. Leukocytový oxidačný prasknutie reguláciou uvoľňovania reaktívnych druhov kyslíka (ROS) a myeloperoxidázy (MPO) z neutrofilov.Okrem toho interakcia medzi doštičkami-neutrofilovými a degranuláciami neutrofilov vedie k tvorbe neutrofil-extracelulárnych pascí (NetS).Siete sa skladajú z neutrofilového jadra a iných intracelulárnych obsahov neutrofilov, ktoré dokážu zachytiť baktérie a zabíjať ich prostredníctvom Netózy.Tvorba sietí je nevyhnutným mechanizmom zabíjania neutrofilov.
Po aktivácii krvných doštičiek môžu monocyty migrovať na choré a degeneratívne tkanivá, kde vykonávajú adhézne aktivity a vylučujú zápalové molekuly, ktoré môžu zmeniť chemotaxiu a proteolytické vlastnosti.Okrem toho môžu doštičky vyvolať aktiváciu monocytov NF-K B na reguláciu efektorovej funkcie monocytov, ktorá je kľúčovým sprostredkovateľom zápalovej reakcie a aktivácie a diferenciácie imunitných buniek.Doštičky ďalej podporujú endogénny oxidačný výbuch monocytov na podporu deštrukcie fagocytových patogénov.Uvoľňovanie MPO je sprostredkované priamou interakciou medzi doštičkami-monocytmi CD40L-MAC-1.Je zaujímavé, že keď p-selektín aktivuje krvné doštičky za akútneho a chronického zápalového tkaniva, chemokíny odvodené od krvných doštičiek PF4, Rantes, IL-1 β a CXCL-12 môžu zabrániť spontánnej apoptóze monocytov, ale podporovať ich diferenciáciu na makrofágy.
Adaptívny imunitný systém
Po tom, čo nešpecifický vrodený imunitný systém rozpoznáva poškodenie mikrobiálneho alebo tkaniva, prevezme špecifický adaptívny imunitný systém.Adaptívne systémy zahŕňajú antigén viažuce B lymfocyty (B bunky) a konvenčné T lymfocyty (Treg), ktoré koordinujú klírens patogénov.T bunky môžu byť zhruba rozdelené do pomocných T buniek (TH bunky) a cytotoxických T bunky (TC bunky, tiež známe ako zabíjačské bunky).TH Bunky sú ďalej rozdelené do buniek Th1, Th2 a Th17, ktoré majú kľúčové funkcie pri zápaloch.TH Bunky môžu vylučovať prozápalové cytokíny (napr. IFN-y 、 TNF-β） a niekoľko interleukínov (napr. IL-17). Sú zvlášť účinné pri prevencii intracelulárneho vírusu a bakteriálnej infekcie. imunitná reakcia. TC bunky sú efektorové bunky, ktoré môžu eliminovať cielené intracelulárne a extracelulárne mikroorganizmy a bunky.
Je zaujímavé, že Th2 bunky produkujú IL-4 a ovplyvňujú polarizáciu M φ, m φ riadenú regeneráciu M φ 2 fenotyp, zatiaľ čo sa zmení IFN-y M φ na zápalový fenotyp M φ 1, ktorý závisí od dávky a času cytokínov.Po aktivácii IL-4 indukuje M-2 bunky Treg na diferenciáciu na Th2 bunky a potom produkuje ďalšie IL-4 (pozitívna spätná väzba).TH Bunky konvertujú M φ Fenotyp je nasmerovaný na regeneratívny fenotyp v reakcii na biologické činidlá tkanivového pôvodu.Tento mechanizmus je založený na dôkazoch, že tieto bunky hrajú významnú úlohu pri kontrole zápalu a opravy tkaniva.
Interakcia do krvných doštičiek v adaptívnej imunite
Adaptívny imunitný systém využíva antigénovo špecifické receptory a pamätá si predtým, ako sa stretli patogény, a ničí ich, keď sa následne stretne s hostiteľom.Tieto adaptívne imunitné reakcie sa však vyvíjali pomaly.Konias a kol.Ukazuje, že zložka krvných doštičiek prispieva k vnímaniu rizika a opravou tkanív a že interakcia medzi doštičkami a leukocytmi podporuje aktiváciu adaptívnej imunitnej odpovede.
Počas adaptívnej imunitnej reakcie doštičky podporujú reakcie monocytov a makrofágov prostredníctvom dozrievania buniek DC a NK, čo vedie k špecifickým reakciám T -buniek a B buniek.Preto komponenty granúl krvných doštičiek priamo ovplyvňujú adaptívnu imunitu exprimovaním CD40L, molekuly, ktorá je nevyhnutná na reguláciu adaptívnej imunitnej reakcie.Doštičky cez CD40L hrajú nielen úlohu pri prezentácii antigénu, ale tiež ovplyvňujú reakciu T buniek.Liu a kol.Zistilo sa, že doštičky komplexne regulujú reakciu CD4 T buniek.Táto diferenciálna regulácia podskupín CD4 T buniek znamená, že doštičky podporujú CD4 T bunky, aby reagovali na zápalové stimuly, čím sa vytvára silné prozápalové a protizápalové reakcie.
Doštičky tiež regulujú adaptívnu reakciu sprostredkovanú B bunkami na mikrobiálne patogény.Je dobre známe, že CD40L na aktivovaných CD4 T bunkách spustí CD40 B buniek, čím poskytne druhý signál potrebný na aktiváciu B lymfocytov závislých od T-buniek, následnú konverziu alotypov a diferenciáciu a proliferáciu B buniek.Všeobecne platí, že výsledky jasne ukazujú rôzne funkcie krvných doštičiek v adaptívnej imunite, čo naznačuje, že doštičky spájajú interakciu medzi T bunkami a B bunkami prostredníctvom CD40-CD40L, čím sa zvyšuje B-bunková reakcia závislá od T-buniek.Okrem toho sú doštičky bohaté na receptory bunkového povrchu, ktoré môžu podporovať aktiváciu krvných doštičiek a uvoľňovať veľké množstvo zápalových a biologických aktívnych molekúl uložených v rôznych častiach krvných doštičiek, čo ovplyvňuje vrodenú a adaptívnu imunitnú odpoveď.
Rozšírená úloha serotonínu odvodeného z krvných doštičiek v PRP
Serotonín (5-hydroxytryptamín, 5-HT) má jasnú kľúčovú úlohu v centrálnom nervovom systéme (CNS) vrátane tolerancie bolesti.Odhaduje sa, že väčšina ľudských 5-HT sa produkuje v gastrointestinálnom trakte a potom cez krvný obeh, kde je absorbovaný doštičkami cez transportér spätného vychytávania serotonínu a ukladá sa do hustých častíc pri vysokej koncentrácii (65 mmol/l).5-HT je dobre známy neurotransmiter a hormón, ktorý pomáha regulovať rôzne neuropsychologické procesy v CNS (centrálny 5-HT).Väčšina 5-HT však existuje mimo CNS (periférne 5-HT) a podieľa sa na regulácii systémových a bunkových biologických funkcií viacerých orgánov, vrátane kardiovaskulárnych, pľúcnych, gastrointestinálnych, urogenitálnych a doštičkových funkčných systémov.5-HT má metabolizmus závislý od koncentrácie na rôznych typoch buniek, vrátane adipocytov, epitelových buniek a bielych krviniek.Periférny 5-HT je tiež silný imunitný modulátor, ktorý môže stimulovať alebo inhibovať zápal a ovplyvniť rôzne imunitné bunky prostredníctvom jeho špecifického 5-HT receptora (5HTR).
Parakrinný a autokrinný mechanizmus HT
Aktivita 5-HT je sprostredkovaná jeho interakciou s 5HTRS, čo je nadrodina so siedmimi členmi (5-HT 1-7) a najmenej 14 rôznych podtypov receptorov, vrátane nedávno objaveného člena 5-HT 7, jeho periférne a Funkcia pri zvládaní bolesti.V procese degranulácie krvných doštičiek aktivované doštičky vylučujú veľké množstvo 5-HT odvodených z krvných doštičiek, ktoré môžu podporovať vaskulárnu kontrakciu a stimulovať aktiváciu susedných doštičiek a lymfocytov prostredníctvom expresie 5-HTR na endoteliálnych bunkách, hladkých svalov a imunitné bunky.Pacala a kol.Mitotický účinok 5-HT na vaskulárne endotelové bunky sa študoval a bol stanovený potenciál podpory rastu poškodených krvných ciev stimuláciou angiogenézy.To, ako sú tieto procesy regulované, nie je úplne jasné, ale môže zahŕňať diferenciálne dvojsmerné signálne dráhy v tkanivovej mikro obvode na reguláciu funkcií vaskulárnych endotelových buniek a buniek hladkého svalstva, fibroblastov a imunitných buniek špecifickými 5-HT receptormi na týchto bunkách .Autokrinná funkcia krvných doštičiek 5-HT po aktivácii krvných doštičiek bola opísaná [Ref].Uvoľňovanie 5-HT zvyšuje aktiváciu krvných doštičiek a nábor cirkulujúcich krvných doštičiek, čo vedie k aktivácii signálnych kaskádových reakcií a protiprúdových efektorov podporujúcich reaktivitu krvných doštičiek.
Imunomodulačný 5-HT účinok
Stále viac dôkazov ukazuje, že serotonín môže hrať úlohu v rôznych 5HTR ako imunitný modulátor.Podľa 5HTR exprimovaného v rôznych leukocytoch zapojených do zápalovej reakcie pôsobí 5-HT odvodený z krvných doštičiek ako imunitný regulátor v vrodených aj adaptívnych imunitných systémoch.5-HT môže stimulovať proliferáciu Treg a regulovať funkcie B buniek, prírodných zabíjacích buniek a neutrofilov náborom DC a monocytov do zápalového miesta.Posledné štúdie ukázali, že 5-HT odvodená z krvných doštičiek môže regulovať funkciu imunitných buniek za špecifických podmienok.Preto je použitie C-PRP koncentrácia krvných doštičiek väčšia ako 1 x 106/µL môže významne pomôcť transportovať koncentráciu 5-HT odvodeného z veľkých doštičiek do tkaniva.V mikroprostredí charakterizovanom zápalovými zložkami môže PRP interagovať s niekoľkými imunitnými bunkami, ktoré hrajú kľúčovú úlohu v týchto patológiách, čo môže ovplyvniť klinické výsledky.
Obrázok zobrazujúci mnohostrannú 5-HT reakciu po aktivácii zápalových doštičiek PRP.Po aktivácii krvných doštičiek doštičky uvoľňujú svoje granule, vrátane 5-HT v hustých granuloch, ktoré majú širokú škálu diferenciálnych účinkov na rôzne imunitné bunky, endoteliálne bunky a bunky hladkého svalstva.Skratky: SMC: Bunky hladkého svalstva, EC: endotelové bunky, Treg: konvenčné T lymfocyty, M ： makrofágy, DC: dendritické bunky, IL: interleukín, IFN-y ： interferón。。 modifikované a upravené z Everts a kol.a Hull a kol.
Analgetický účinok PRP
Aktivované doštičky uvoľnia mnoho prozápalových a protizápalových mediátorov, ktoré môžu nielen spôsobiť bolesť, ale tiež znižovať zápal a bolesť.Po použití typická dynamika krvných doštičiek PRP mení mikroprostredie pred opravou a regeneráciou tkaniva prostredníctvom rôznych komplexných dráh súvisiacich s anabolizmom a katabolizmom, proliferáciou buniek, diferenciáciou a reguláciou kmeňových buniek.Tieto charakteristiky PRP vedú k aplikácii PRP v rôznych klinických patologických stavoch obvykle spojených s chronickou bolesťou (ako je športové poškodenie, ortopedické ochorenie, ochorenie miechy a komplexná chronická rana), hoci presný mechanizmus nebol úplne stanovený.
V roku 2008 Evertz a kol.Je to prvá randomizovaná kontrolovaná štúdia, ktorá hlási analgetický účinok prípravy PRP, ktorá sa pripravuje z hnedej vrstvy autológnej rýchlosti sedimentácie erytrocytov a aktivovaná autológnym trombínom po operácii ramena.Zaznamenali významné zníženie skóre vizuálnej analógovej stupnice, použitie analgetík založených na opioidoch a úspešnejšiu pooperačnú rehabilitáciu.Je pozoruhodné, že odrážajú analgetický účinok aktivovaných doštičiek a špekulujú na mechanizme krvných doštičiek uvoľňujúcich 5-HT.Stručne povedané, doštičky sú spiace v čerstvo pripravenom PRP.Po priamej alebo nepriamej aktivácii krvných doštičiek (tkanivový faktor) menia doštičky tvar a vytvárajú dostatočne nepravdivé na podporu agregácie krvných doštičiek.Potom uvoľňujú intracelulárne a- a husté častice.Tkanivo ošetrené aktivovaným PRP bude napadnuté PGF, cytokínmi a inými lyzozómami krvných doštičiek.Presnejšie povedané, keď husté častice uvoľnia svoj obsah, uvoľnia veľké množstvo 5-HT, ktoré reguluje bolesť.V C-PRP je koncentrácia krvných doštičiek 5 až 7-krát vyššia ako v periférnej krvi.Preto je uvoľňovanie 5-HT z doštičiek astronomické.Je zaujímavé, že Sprott a kol.Správa pozorovala, že bolesť sa významne uľavila po akupunktúre a moxibustion, koncentrácia krvných doštičiek 5-HT bola významne znížená a potom sa zvýšila hladina plazmy 5-HT.
V periférnych doštičkách, žírnych bunkách a endotelových bunkách uvoľnia endogénne 5-HT počas poškodenia tkaniva alebo chirurgickej traumy.Je zaujímavé, že v periférnej oblasti sa detegovalo rôzne 5-HT receptory neurónov, čo potvrdilo, že 5-HT môže interferovať s nociceptívnym prenosom v periférnej oblasti.Tieto štúdie ukazujú, že 5-HT môže ovplyvniť nociceptívny prenos periférnych tkanív prostredníctvom receptorov 5-HT1, 5-HT2, 5-HT3, 5-HT4 a 5-HT7.
Systém 5-HT predstavuje silný systém, ktorý môže po škodlivej stimulácii znížiť a zvýšiť stupeň bolesti.U pacientov s chronickou bolesťou bola hlásená centrálna a periférna regulácia nociceptívnych signálov a zmeny v systéme 5-HT.V posledných rokoch sa veľké množstvo štúdií zameralo na úlohu 5-HT a jeho príslušných receptorov pri spracovaní a regulácii škodlivých informácií, čo viedlo k liekom, ako sú selektívne inhibítory spätného vychytávania serotonínu (SSRI).Tento liek inhibuje spätné vychytávanie serotonínu do presynaptických neurónov po uvoľnení serotonínu.Ovplyvňuje trvanie a intenzitu komunikácie serotonínu a je alternatívnou liečbou chronickej bolesti.Je potrebný ďalší klinický výskum, aby sa jasne pochopil molekulárny mechanizmus regulácie bolesti odvodenej od 5-HT pri chronických a degeneratívnych chorobách.
Ostatné údaje na vyriešenie potenciálneho analgetického účinku PRP sa dajú získať po teste analgetického zvieracieho modelu.Porovnávacie štatistické závery v týchto modeloch sú náročné, pretože tieto štúdie obsahujú príliš veľa premenných.Niektoré klinické štúdie sa však zaoberali nociceptívnymi a analgetickými účinkami PRP.Niekoľko štúdií ukázalo, že pacienti, ktorí dostávajú liečbu na tendinózu alebo slzy rotátorov, majú len malú úľavu od bolesti.Naopak, niekoľko ďalších štúdií ukázalo, že PRP môže znížiť alebo dokonca odstrániť bolesť pacientov s degeneráciou šľachy, OA, plantárnou fasciitídou a inými chorobami chodidiel a členkov.Konečná koncentrácia krvných doštičiek a zloženie biologických buniek boli identifikované ako kľúčové charakteristiky PRP, ktoré pomáhajú pozorovať konzistentný analgetický účinok po aplikácii PRP.Medzi ďalšie premenné patrí metóda dodávania PRP, technológia aplikačnej techniky, protokol aktivácie krvných doštičiek, úroveň biologickej aktivity PGF a cytokíny uvoľnené, tkanivový typ aplikácie PRP a typ zranenia.
Je pozoruhodné, že Kuffler vyriešil potenciál PRP pri zmierňovaní bolesti u pacientov s miernou až ťažkou chronickou neuropatickou bolesťou, sekundárne po poškodenom neregeneratívnom nerve.Účelom tejto štúdie je preskúmať, či sa neuropatická bolesť môže znížiť alebo ustúpiť v dôsledku PRP podporujúceho axonálnu regeneráciu a reinerváciu cieľového nervu.Prekvapivo je medzi pacientmi, ktorí dostávajú liečbu, neuropatická bolesť stále eliminuje alebo zmierňuje najmenej šesť rokov po operácii.Okrem toho všetci pacienti začali zmierňovať bolesť do troch týždňov po aplikácii PRP.
Nedávno boli v oblasti pooperačnej rany a starostlivosti o pleť pozorované podobné analgetické PRP účinky.Je zaujímavé, že autori hlásili fyziologické aspekty bolesti rany spojených s vaskulárnym poškodením a hypoxiou kožného tkaniva.Diskutovali tiež o dôležitosti angiogenézy pri optimalizácii okysličenia a dodávania živín.Ich štúdia ukázala, že v porovnaní s kontrolnou skupinou mali pacienti, ktorí dostávali liečbu PRP menšiu bolesť a významne zvýšili angiogenézu.Nakoniec Johal a jeho kolegovia vykonali systematický prehľad a metaanalýzu a dospeli k záveru, že PRP môže po použití PRP v ortopedických indikáciách znížiť bolesť, najmä u pacientov, ktorí dostávajú vonkajšiu epicondylitídu a liečbu OA kolena.Bohužiaľ, táto štúdia nešpecifikovala účinky bielych krviniek, koncentrácie krvných doštičiek alebo použitia exogénnych aktivátorov krvných doštičiek, pretože tieto premenné by ovplyvnili celkovú účinnosť PRP.Optimálna koncentrácia krvných doštičiek PRP pre maximálnu úľavu od bolesti nie je jasná.V modeli krysy tendinózy bola koncentrácia krvných doštičiek 1,0 x 106 / μ pri L, bolesť sa môže úplne zmierniť, zatiaľ čo úľava bolesti spôsobená PRP s polovicou koncentrácie krvných doštičiek je významne znížená.Preto povzbudzujeme viac klinických štúdií, aby sme skúmali analgetické účinky rôznych prípravkov PRP.
Účinok PRP a angiogenéza
Prípravky C-PRP v presnej regeneračnej medicíne umožňujú dodávanie biomolekúl uvoľňovaných vysokými koncentráciami doštičiek aktivovaných v cieľových tkanivových miestach.Preto sa začali rôzne kaskádové reakcie, ktoré prispievajú k imunitnej regulácii na mieste, zápalovým procesom a angiogenéze na podporu hojenia a opravy tkanív.
Angiogenéza je dynamický multi-krokový proces zahŕňajúci klíčenie a tkanivové mikroesel z už existujúcich krvných ciev.Angiogenéza postupovala v dôsledku rôznych biologických mechanizmov vrátane migrácie endoteliálnych buniek, proliferácie, diferenciácie a delenia.Tieto bunkové procesy sú predpokladmi pre tvorbu nových krvných ciev.Sú nevyhnutné pre rast už existujúceho krvných ciev na obnovenie prietoku krvi a na podporu vysokej metabolickej aktivity opravy tkanív a regenerácie tkanív.Tieto nové krvné cievy umožňujú dodávanie kyslíka a živín a odstránenie vedľajších produktov z ošetrených tkanív.
Aktivita angiogenézy je regulovaná stimuláciou angiogénneho faktora VEGF a antiangiogénnych faktorov (napr. Angiostatín a trombospondín-1 [TSP-1]).V chorobnom a degradovanom mikroprostredí (vrátane nízkeho napätia kyslíka, nízkeho pH a vysokej hladiny kyseliny mliečnej), miestne angiogénne faktory obnovia aktivitu angiogenézy.
Niekoľko rozpustných médií doštičiek, ako napríklad základné FGF a TGF-P a VEGF, môže stimulovať endotelové bunky na výrobu nových krvných ciev.Spoločnosť Landsdown a Fortier uviedli rôzne výsledky týkajúce sa zloženia PRP vrátane zdrojov mnohých angiogénnych regulátorov v vnútri.Okrem toho dospeli k záveru, že zvýšenie angiogenézy prispieva k hojeniu MSK ochorenia v oblastiach so zlou vaskularizáciou, ako je roztrhnutie menisku, poškodenie šľachy a ďalšie oblasti so zlou vaskularizáciou.
Podporovanie a antiangiogénne vlastnosti krvných doštičiek
V posledných niekoľkých desaťročiach publikované štúdie dokázali, že doštičky zohrávajú kľúčovú úlohu pri primárnej hemostáze, tvorbe zrazenín, rastovom faktoroch a uvoľňovaní cytokínov a regulácii angiogenézy v rámci procesu opravy tkanív.Paradoxne, PRP a- granuly obsahujú arzenál proangiogénnych rastových faktorov, antiangiogénne proteíny a cytokíny (ako je PF4, inhibítor aktivátora plazminogénu-1 a TSP-1) a zameriavajú sa na uvoľňovanie špecifických faktorov, ktoré hrajú úlohu .Úloha v angiogenéze.Preto úloha PRP pri kontrole regulácie angiogenézy môže byť definovaná aktiváciou špecifických receptorov bunkového povrchu, TGF-β iniciuje proangiogénne a antiangiogénne reakcie.Schopnosť krvných doštičiek cvičiť angiogenézu dráha bola potvrdená v patologickej angiogenéze a nádorovej angiogenéze.
Angiogénny rastový faktor odvodený od krvných doštičiek a antiangiogénny rastový faktor odvodený od a- a hustých a adhezívnych molekúl.Najdôležitejšie je, že sa všeobecne uznáva, že celkový účinok krvných doštičiek na angiogenézu je proangiogénny a stimulujúci.Očakáva sa, že terapia PRP bude kontrolovať indukciu angiogenézy, ktorá prispieva k liečebnému účinku mnohých chorôb, ako je hojenie rán a oprava tkaniva.Podávanie PRP, konkrétnejšie podávanie vysoko koncentračných PGF a iných cytokínov doštičiek, môže indukovať angiogenézu, angiogenézu a arteriogenézu, pretože faktor 1A odvodený od stromálnych buniek viaže na receptor CXCR4 na endoteliálnych progenitorových bunkách.Bill a kol.Navrhuje sa, že PRP zvyšuje ischemickú neovaskularizáciu, ktorá môže byť spôsobená stimuláciou angiogenézy, angiogenézy a arteriogenézy.Vo svojom in vitro modeli boli proliferácia endotelových buniek a tvorba kapilár inukované veľkým počtom rôznych PDG, z ktorých VEGF bol hlavným angiogénnym stimulátorom.Ďalším dôležitým a základným faktorom na obnovenie angiogenéznej dráhy je synergia medzi viacerými PGF.Richardson a kol.Dokázalo sa, že synergická aktivita angiogénneho faktora odvodeného z krvných doštičiek BB (PDGF-BB) a VEGF viedla k rýchlej tvorbe zrelej vaskulárnej siete v porovnaní s aktivitou jednotlivého rastového faktora.Kombinovaný účinok týchto faktorov bol nedávno potvrdený v štúdii na zvýšenie cerebrálneho kolaterálneho obehu u myší s dlhodobou hypoperfúziou.
Najdôležitejšie je, že štúdia in vitro merala proliferatívny účinok endotelových buniek ľudskej pupočnej žily a rôzne koncentrácie krvných doštičiek na výber prípravného zariadenia PRP a stratégie dávky krvných doštičiek a výsledky ukázali, že optimálna dávka krvných doštičiek bola 1,5 x 106 krvných doštičiek/ μl. 50. Na podporu angiogenézy.Príliš vysoká koncentrácia krvných doštičiek môže inhibovať proces angiogenézy, takže účinok je zlý.
Starnutie buniek, starnutie a PRP
Celková starnutie môže byť indukovaná rôznymi stimulmi.Toto je proces, v ktorom bunky prestanú deliť a podliehať jedinečným fenotypovým zmenám, aby sa zabránilo neobmedzenému rastu poškodených buniek, čo hrá dôležitú úlohu pri prevencii rakoviny.V procese fyziologického starnutia bude starnutie replikácie buniek podporovať aj starnutie buniek a zníži sa regeneračná schopnosť MSC.
Účinky starnutia a starnutia buniek
In vivo, mnoho typov buniek bude počas starnutia starnúť a akumulovať v rôznych tkanivách, medzi ktorými existuje veľké množstvo starnúcich buniek.Zdá sa, že akumulácia starnúcich buniek sa zvyšuje so zvýšením veku, poškodenia imunitného systému, poškodenia tkaniva alebo faktorom súvisiacimi s stresom.Mechanizmus bunkového starnutia bol identifikovaný ako patogénny faktor chorôb súvisiacich s vekom, ako je osteoartritída, osteoporóza a degenerácia intervertebrálnych diskov.Rôzne stimuly zhoršia starnutie buniek.V reakcii bude sekrečný fenotyp súvisiaci s starnutím (SASP) vylučovať vysoké koncentrácie proteínových buniek a cytokínov.Tento špeciálny fenotyp súvisí so starnutím buniek, v ktorých vylučujú vysoké hladiny zápalových cytokínov (ako sú IL-1, IL-6, IL-8), rastové faktory (ako je TGF-β 、 HGF, VEGF, PDGF), MMP a katepsin.V porovnaní s mladými ľuďmi sa ukázalo, že SAPS sa zvyšuje s vekom, pretože proces ustáleného stavu je zničený, čo vedie k starnutiu buniek a zníženej schopnosti regenerácie.Konkrétne pri chorobách kĺbov a chorobách kostrových svalov.V tejto súvislosti sa imunitné starnutie považuje za významnú zmenu v sekrécii imunitných buniek, čo naznačuje, že koncentrácia TNF-A, IL-6 a/alebo IL-1B sa zvyšuje, čo vedie k chronickému zápalu nízkej úrovne.Je potrebné poznamenať, že dysfunkcia kmeňových buniek súvisí aj s nebululárnymi autonómnymi mechanizmami, ako sú starnúce bunky, najmä produkcia prozápalových a antiregeneratívnych faktorov prostredníctvom SASP.
Naopak, SASP môže tiež stimulovať plasticitu buniek a preprogramovanie susedných buniek.Okrem toho môže SASP organizovať komunikáciu s rôznymi imunitnými mediátormi a aktivovať imunitné bunky na podporu klírensu starnúcich buniek.Pochopenie úlohy a funkcie starnúcich buniek prispeje k hojeniu a remodelácii tkanív MSK svalov a chronických rán.
Je pozoruhodné, že Ritcka a kol.Uskutočnila sa rozsiahla štúdia a objavila sa hlavná a prospešná úloha SASP pri podpore plasticity buniek a regenerácie tkanív a zaviedla sa koncept prechodného dodávania starnúcich buniek.Opatrne uviedli, že starnutie je hlavne prospešný a regeneračný proces.
Starnutie buniek a potenciál PRP
Keď sa počet kmeňových buniek znižuje, starnutie ovplyvní výkon kmeňových buniek.Podobne u ľudí sa s vekom tiež znižujú charakteristiky kmeňových buniek (ako je suchosť, proliferácia a diferenciácia).Wang a Nirmala uviedli, že starnutie by znížilo charakteristiky kmeňových buniek šľachových buniek a počet receptorov rastového faktora.Štúdia na zvieratách ukázala, že koncentrácia PDGF u mladých koní bola vysoká.Dospeli k záveru, že zvýšenie počtu receptorov GF a počet GF u mladých jedincov môže mať lepšiu bunkovú reakciu na liečbu PRP ako starší jedinci u mladých jedincov.Tieto zistenia ukazujú, prečo môže byť liečba PRP menej účinná alebo dokonca neúčinná u starších pacientov s menším počtom kmeňových buniek a „zlej kvality“.Dokázalo sa, že proces starnutia starnutia chrupavky sa obráti a po injekcii PRP sa zvýši pokojové obdobie chondrocytov.Jia a kol.Používa sa na štúdium dermálnych fibroblastov myši in vitro fotoglikovanie, s liečbou PRP a bez PRP, na objasnenie mechanizmu kontrakcie PGF v tomto modeli.Skupina PRP vykázala priamy účinok na extracelulárnu matricu, zvýšený kolagén typu I a znížil syntézu metaloproteináz, čo naznačuje, že PRP môže pôsobiť proti starnutiu buniek, ako aj pri degeneratívnej MSK ochore.
V inej štúdii sa PRP použil na zhromažďovanie kmeňových buniek kostnej drene vo veku od veku myší.Zistilo sa, že PRP môže obnoviť rôzne funkcie kmeňových buniek z starnutia, ako je proliferácia buniek a tvorba kolónií, a rekonštruovať markery súvisiace so starnutím buniek.
Oberlohr a jeho kolegovia nedávno rozsiahle študovali úlohu starnutia buniek pri oslabovaní regenerácie svalov a hodnotili Plazmu PRP a plazmy chudobných na doštičku (PPP) ako možnosti biologickej liečby opravy kostrových svalov.Predpokladali, že liečba PRP alebo PPP pri oprave kostrových svalov by bola založená na biologických faktoroch prispôsobených pre SASP špecifické bunkové markery a ďalšie faktory, ktoré vedú k vývoju fibrózy.
Je rozumné veriť, že pred aplikáciou PRP môže cielené starnutie buniek zlepšiť regeneračné charakteristiky účinnosti biologickej liečby znížením miestnych faktorov SASP.Bolo navrhnuté, že ďalšou možnosťou zlepšenia výsledkov liečby regenerácie kostrových svalov PRP a PPP je selektívne odstraňovanie starnúcich buniek starnutím vychytávačmi.Niet pochýb o tom, že nedávne výsledky výskumu vplyvu PRP na starnutie buniek a starnutie sú fascinujúce, ale stále sú v počiatočnej fáze.Preto je neprimerané predložiť akékoľvek návrhy.
（Obsah tohto článku je pretlačený a neposkytujeme žiadnu výslovnú ani implicitnú záruku za presnosť, spoľahlivosť alebo úplnosť obsahu obsiahnutého v tomto článku a nezodpovedáme za názory na tento článok, prosím pochopte.）
Čas odoslania: Mar-01-2023